本發明公開了基于納米抗體檢測氟蟲腈殘留的ELISA試劑盒及其應用，所述試劑盒包括盒體、設在盒體內的酶標板以及試劑；其中，酶標板的每個孔包被有氟蟲腈包被抗原，所述試劑包括抗氟蟲腈納米抗體、氟蟲腈標準溶液、酶標記的二抗、緩沖液PBS、洗滌液PBST、底物液、顯色液和反應終止液等。檢測過程中，酶標板孔壁上吸附的包被抗原和待測氟蟲腈相互競爭與抗體反應，通過顯色反應觀察結果。本發明還提供一條用于構建駝科動物噬菌體展示納米抗體文庫的C端通用PCR引物。本發明的優點是能準確靈敏地檢測水、蔬菜中氟蟲腈殘留，樣品的前處理過程簡單，耗時少，能同時檢測大量的樣品，樣品檢測成本遠低于傳統的儀器檢測方法。
